pUCD_recA重組發光菌構建及對遺傳毒性污染物響應作用
論文類型 | 基礎研究 | 發表日期 | 2009-06-01 |
來源 | 環境科學 | ||
作者 | 黃新新,何苗,,羅虹,,施漢昌,,蔡強 | ||
關鍵詞 | 重組發光菌;遺傳毒性;pUCD2recA 載體;響應效應 | ||
摘要 | 基因重組發光菌在水質毒性的評價中具有重要的作用,本研究從分析污染物毒性損傷的機制出發,構建新型pUCD2 recA基因重組發光菌. 用PCR 法從大腸桿菌W3110 中擴增recA 基因,將其與pGEM2T easy 載體連接后測序. 測序正確的recA 片段及pUCD615 載體均用BamH Ⅰ、EcoR Ⅰ雙酶切,連接后電轉化導入宿主菌JM109. 挑取克隆,提取質粒用PCR 鑒定,陽性克隆再進行測序. 將構建成功的pUCD2recA 載體轉化入大腸桿菌RFM443 ,加入相應的遺傳毒性污染物,觀察發 |
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